苏木素染色原理及配制方法

在病理科中，任何组织的切片，如果不进行染色，看不到组织的细微结构，看不到细胞核，就无法分辨出肿瘤的良恶性，不能向临床医师提供诊断依据，更不能为病人的正确治疗提供方案。所以染色在病理组织形态学的诊断、科学实验研究以及教学工作中具有重要的意义和实用价值。

科学的进步和质量控制的需要，现市场有多家提供商品化的各种成品染色试剂，已被各大医院病理科和实验室所接受。但是，我们的病理技术人员也要必须掌握各种试剂的配制和染色原理，否则，难以制出合格的病理切片。

一、苏木素来源及染色原理

苏木素是一种天然染料，是从苏木素树的树心木提炼出来的。它原产于墨西哥的坎佩切，因此而得名。它多生长在西印度群岛，虽然使用年限较早，但是着色性能一直很差。直到70年代苏木素有了新的提取方法，是将苏木树锯倒后剥去外皮，将树心木先用热水浸泡，再加尿素沉淀后制成的染料才比较稳定。自从有苏木素以来，苏木素在单独使用时着色能力很差，但仍然是最常用的染细胞核的组织学染料。为了获得最佳的苏木素染色液必须具备以下两个条件：一是必须能产生有效成分苏木因；二是染色时需要加适量的媒染剂（如硫酸铝钾、氯化铁及硫酸铁胺等）。

苏木素所以被称为染料是因为苏木素的分子氧化后成为生物染料——氧化苏木红。在常规苏木素伊红染色中，苏木素经过氧化变成酸性染料苏木红，苏木红与二价或三价的金属盐或氢氧化物结合形成带正电荷的蓝色色精，只有在这种情况下才能与细胞中带负电荷的脱氧核糖核酸结合完成染色。苏木红和媒染剂的结合不但较好地显示细胞核成分，还可与组织中的其他物质进行结合。苏木素呈淡黄色，用人工氧化的方法可以快速全部地将苏木素变成苏木红。但如果过氧化就会破坏染料的分子结构影响染色力。

二、苏木素配制方法：

1. 2000ml蒸馏水加入80g硫酸铝钾（加热）

2. 200ml无水乙醇加入10g苏木精摇动使之完全溶解。

3. 上述两种混合加热。

4. 3g氧化汞溶于20ml蒸馏水中搅匀后缓缓（一定要缓慢）注入苏木精液体中，搅匀。

5. 氧化汞加完后用玻璃棒充分搅拌液体并继续加热至沸腾。

6.     转移至冷水中迅速降温至室温。

7.     密封、室温避光储存备用，临用前每100ml苏木精液加入2-3ml冰乙酸混匀。

我院病理科目前有在使用商品化的成品染色试剂，但也在使用原材料配制的苏木素，和买商品化的成品苏木素试剂效果大同小异，优点在于降低试剂成本，更换频率提高，从而保证染色的稳定性。（病理科 窦丽珍）