免疫组化染色MMR在临床中的应用

对组织切片或细胞标本中的某些化学成分进行原位的定性、定位或定量研究，这种技术称为免疫组织化学技术或免疫细胞化学技术。众所周知，抗体与抗原之间的结合具有高度的特异性。免疫组化正是利用这一特性，即先将组织或细胞中的某些化学物质提取出来，以其作为抗原或半抗原去免疫小鼠等实验动物，制备特异性抗体，再用这种抗体（第一抗体）作为抗原去免疫动物制备第二抗体，并用某种酶（常用辣根过氧化物酶）或生物素等处理后再与前述抗原成分结合，将抗原放大，由于抗体与抗原结合后形成的免疫复合物是无色的，因此，还必须借助于组织化学方法将抗原抗体反应部位显示出来（常用显色剂DAB显示为棕黄色颗粒）。通过抗原抗体反应及呈色反应，显示细胞或组织中的化学成分，在显微镜下可清晰看见细胞内发生的抗原抗体反应产物，从而能够在细胞或组织原位确定某些化学成分的分布、含量。组织或细胞中凡是能作抗原或半抗原的物质，如蛋白质、多肽、氨基酸、多糖、磷脂、受体、酶、激素、核酸及病原体等都可用相应的特异性抗体进行检测。

DNA 错配修复系统（MMR）是指能修复 DNA 碱基错配的安全保障体系，MMR 基因通过其编码的 MMR 蛋白形成各种不同的异源二聚体之间的相互作用识别并修复微卫星 DNA 在复制过程中的错误和损伤，可以保证遗传物质的完整性和稳定性，以避免遗传物质发生突变。MMR 系统的失活（例如林奇综合征等）会引起自发突变率的增高，导致微卫星不稳定，从而引发肿瘤尤其是结直肠癌的产生。

MMR 蛋白检测主要用于对林奇综合征筛查，对于符合家系诊断标准的先证者的正常细胞进行 MMR 蛋白检测，如果出现蛋白表达丢失则须进行 DNA 外显子测序或 DNA 片段缺失分析。对于出现突变的病例家系成员进行遗传突变检测，有遗传突变的成员则需要进入突变携带者的管理流程，无突变的则参考一般人群筛查。在预后判断方面，与微卫星稳定(MSS)患者相比，高度微卫星不稳定(MSI-H)患者死亡风险降低 35%，且 dMMR/MSI-H 型 Ⅱ 期结直肠癌患者预后较好。MMR 蛋白检测也可用来指导治疗，但 dMMR/MSI-H 型 Ⅱ 期结直肠癌患者不能从 5-FU 的辅助治疗中获益。此外，免疫治疗已经成为结肠直肠癌治疗领域的研究热点。2020 年 6 月，中国临床肿瘤学会结直肠癌委员会专家联合制定了《结直肠癌免疫治疗专家共识》，他们认为对于 dMMR/MSI-H 的转移性结直肠癌患者而言，单独阻滞细胞程序性死亡配体-1(PD-1)或联合使用抗细胞毒性 T 淋巴细胞相关蛋白（anti-CTLA-4）的治疗均能够实现持久的响应，并建议 PD-1 抑制剂应当作为 dMMR/MSI-H 的转移性结直肠癌患者的一线标准治疗方案。（病理科 黎海南）